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液氮超低温保藏技术简介

发布时间:2019-11-05 11:33:56 浏览:249次

液氮超低温保藏技术是将菌种保藏在-196 ℃的液态氮,或在-150 ℃的氮气中的长期保藏方法,它的原理是利用微生物在-130 ℃以下新陈代谢趋于停止而有效地保藏微生物。液氮罐厂家介绍其操作步骤如下:

1、安瓿管或冻存管的准备

用圆底硼硅玻璃制品的安瓿管,或螺旋口的塑料冻存管。注意玻璃管不能有裂纹。将冻存管或安瓿管清洗干净,121 ℃下高压灭菌(15~20) min,备用。

2、保护剂的准备

保护剂种类要根据微生物类别选择。配制保护剂时,应注意其浓度,一般采用10 %~20 %甘油。

液氮超低温保藏技术简介

3、微生物保藏物的准备(如何为微生物保藏物做准备?)

4、预冻(如何为物质做预冻处理?)

5、保藏

将安瓿管或塑料冻存管置于液氮罐中保藏。一般气相中温度为-150 ℃,液相中温度为-196℃。

6、复苏方法

液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在38 ℃~40 ℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50 s~100 s。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养。

*后,通过操作,根据自身实验体会,比较几种菌种保藏方法的利弊,做出*终的答案。特别提醒大家在操作时一定要注重自身安全,做好防护措施。